VSC4.1 大鼠脊髓前角運動神經元瘤

我們主要的產品有：病理學檢測服務，細胞與蛋白，分子生物學檢測，動物實驗造模，科研細胞及相關周邊配套產品與服務。

細胞產品：包含細胞系、原代細胞、永生化細胞（支持定制），Luc示蹤細胞、IPS細胞、耐藥株、細胞代購服務。

病理服務：包含普通病理（包埋，切片，染色）、分子病理（組化、免疫熒光、TUNEL、原味雜交）、病理圖像（切片掃描、單標多標、共聚焦、三維重建）、超微病理（透射電鏡、掃描電鏡、免疫電鏡服務）。

培養基產品：包含基礎培養基如DMEM、DMEM/F12、1640、MEM、EMEM、F12、F12K、L15、DMEM低碳、1640低碳，無酚紅定制產品等基礎培養基供應。

細胞系專用培養基：涵蓋我庫所有細胞系對應的專用培養基（含血清，因子，雙抗等），價格實惠。

原代細胞專用培養基包括：

DELF原代上皮細胞專用培養基（EpiCM）

DELF原代成纖維細胞專用培養基（FM）

DELF原代內皮細胞專用培養基（ECM）

IPS人誘導多能干細胞專用培養基

DELF原代神經元細胞專用培養基

DELF原代少突膠質細胞專用培養基

DELF原代星形膠質細胞專用培養基

DELF原代肝實質細胞專用培養基

DELF原代星狀細胞專用培養基

DELF原代角質形成細胞專用培養基

DELF原代巨噬細胞專用培養基

DELF原代間充質干細胞專用培養基

DELF原代內皮祖細胞專用培養基

DELF原代神經干細胞專用培養基

DELF原代周細胞專用培養基

DELF原代雪旺細胞專用培養基

DELF原代黑色素細胞專用培養基

DELF原代骨骼肌細胞專用培養基

DELF原代成骨細胞專用培養基

DELF原代軟骨細胞專用培養基

DELF原代腎系膜細胞專用培養基

DELF原代心肌細胞專用培養基

DELF原代前脂肪細胞專用培養基

DELF原代間充質干細胞無血清專用培養基

DELF原代平滑肌細胞專用培養基

DELF原代平滑肌細胞低血清專用培養基

DELF原代腫瘤細胞專用培養基

DELF原代間質細胞專用培養基

DELF原代T淋巴細胞專用培養基

DELF原代卵巢顆粒細胞專用培養基

DELF原代肥大細胞專用培養基

DELF原代破骨細胞專用培養基

DELF原代NK細胞專用培養基

DELF原代內膜細胞專用培養基

DELF原代B淋巴細胞專用培養基

DELF原代精原細胞專用培養基

DELF原代樹突狀（DC）細胞專用培養基

DELF原代肝卵圓細胞專用培養基

DELF原代腎足細胞專用培養基

DELF原代基底細胞專用培養基

DELF原代基質細胞專用培養基

DELF原代CIK細胞專用培養基

DELF原代淋巴細胞專用培養基

DELF原代肌腱細胞專用培養基

DELF原代卵泡膜細胞專用培養基

DELF原代支持細胞專用培養基

DELF原代髓核細胞專用培養基

DELF原代脂肪細胞專用培養基

DELF原代絨毛膜滋養層細胞專用培養基

請注意：

所有500ml專用培養基采用分裝形式發貨，其中細胞因子，雙抗，血清采用干冰發貨，基礎培養基采用冰袋發貨。收到貨后根據業務經理提示的配置方式進行配置，各成分按照存儲溫度分開存儲。

1）細胞凍存復蘇操作

取裝有1 mL 細胞懸液的凍存管，置于 37 ℃水浴中快速振蕩至完全解凍；將細胞懸液移入裝有 4~6 mL 完全培養基的離心管，充分混勻。 1000 RPM 離心 3~5 min，棄除上清，加入新鮮完全培養基重懸細胞。把細胞懸液接種至培養瓶（培養皿），補加 6~8 mL 完全培養基，于 37 ℃恒溫培養箱靜置培養過夜。次日在顯微鏡下觀察細胞狀態與匯合密度。

2）細胞傳代培養

當細胞匯合度達到 80%~90% 時即可進行傳代操作。 本細胞貼壁性能弱，屬于半貼壁 + 半懸浮混合生長型細胞，傳代操作步驟如下：

1. 細胞收集 先把培養瓶內懸浮細胞全部轉移至離心管；采用無鈣鎂 PBS 洗滌貼壁細胞 1~2 次。該細胞貼壁不牢固，洗滌過程中貼壁細胞會隨 PBS 脫落，因此洗滌液同樣收集至離心管內。

2. 胰酶消化 向培養瓶內加入 0.25%(w/v) 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA 消化液（T25 培養瓶加 1~2 mL，T75 培養瓶加 2~3 mL），放入 37 ℃培養箱消化 1~2 min；若細胞較難消化，可適度延長消化時長。顯微鏡下觀察，待絕大多數細胞回縮變圓、開始脫壁后迅速取出培養瓶，輕敲瓶壁，隨即加入 3~4 mL 含 10% 胎牛血清的培養基終止胰酶消化。

3. 離心分瓶接種 將懸浮細胞、PBS 洗滌細胞與胰酶消化收獲的所有細胞合并，1000 rpm 離心 5 min，棄上清。加入 1~2 mL 新鮮培養基充分重懸，按照 1:2 的比例分裝至新 T25 培養瓶，每瓶補加 6~8 mL 新鮮配制的完全培養基，維持細胞活性。后續傳代可依據細胞生長速率，調整分裝比例為 1:2 ~ 1:5。

3）細胞凍存保種

建議在細胞到貨后的前 3 代完成種子細胞凍存，留存保種庫，保障后續實驗供給。 以 T25 培養瓶為例，操作流程如下：

1.參照細胞傳代流程完成細胞消化與收集，使用血球計數板測定活細胞濃度。推薦凍存終密度：(1×106 至1×107) 個活細胞 /mL。

2.1000 rpm 離心 3~5 min，充分棄除上清液；用預先配制好的凍存液重懸細胞，調整濃度至目標密度，分裝至細胞凍存管。在凍存管外壁清晰標注細胞名稱、細胞代數、凍存日期等關鍵信息。

3.將凍存管放入程序降溫盒，置于 - 80 ℃冰箱梯度降溫過夜；次日轉移至液氮罐中長期保存，同步登記凍存位置編號，方便后續調取。

懸浮細胞傳代方法

1.當細胞密度達到8-10×105cell/ml 時，進行傳代處理。

2.在生物安全柜無菌環境下打開培養瓶，將瓶內全部細胞懸液移入離心管。

3.1000 rpm 離心 5 min，離心結束后棄除上清培養液。

4.準備 2 支全新 T-25 培養瓶。向細胞沉淀中加入完全培養基充分重懸，把細胞濃度調整至 2-4×105cell/ml，均分接種至兩個培養瓶內，每瓶補加培養基至 6～8 mL。

5.水平平放培養瓶，輕輕搖勻細胞懸液，放入 37 ℃、5% CO?恒溫培養箱靜置培養。

僅用于科研，不用于臨床